技術(shù)文章
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揭示癌細(xì)胞逃避T細(xì)胞“追殺”的核心通路,CRISPR技術(shù)發(fā)現(xiàn)182個(gè)潛在免疫療法靶點(diǎn)免疫治療是通過調(diào)動癌癥患者自身的免疫系統(tǒng),增強(qiáng)免疫細(xì)胞的功能來消除癌癥的治療方法,被稱為癌癥治療的“第三次革命”。但問題在于,僅部分患者能夠從免疫療法中受益,大部分患者對該療法沒有反應(yīng)。因此,找到癌細(xì)胞的免疫逃逸機(jī)制將促使免疫療法的進(jìn)一步普及,為更多癌癥患者帶來生存的希望。近日,由多倫多大學(xué)唐納利細(xì)胞與生物分子研究中心的JasonMoffat教授領(lǐng)導(dǎo)的一支研究團(tuán)隊(duì)在《Nature》發(fā)布了一篇題...
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細(xì)胞污染問題分析解決細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí),細(xì)胞狀態(tài)的好壞對轉(zhuǎn)染效率有很大影響。細(xì)胞污染可能會導(dǎo)致細(xì)胞死亡,本文主要總結(jié)了細(xì)胞培養(yǎng)中常見污染現(xiàn)象和解決方法。凡是對細(xì)胞生長有危害的成分或者造成細(xì)胞不純的異物都視為污染。細(xì)胞污染根據(jù)污染源可以分為化學(xué)污染,物理污染和生物污染。本文主要描述微生物污染的現(xiàn)象及解決方法微生物污染1.細(xì)菌:細(xì)菌污染常見的有大腸桿菌,葡萄球菌等。細(xì)菌污染較易發(fā)現(xiàn),在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,培養(yǎng)液一般會在短時(shí)間內(nèi)變黃,有時(shí)靜置的培養(yǎng)液不混,稍加震蕩,變會有很多混濁...
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本文主要介紹穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的原理、步驟,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠得到穩(wěn)定高表達(dá)的細(xì)胞株,是滿足活性蛋白大量制備的方法。利用哺乳動物系統(tǒng)生產(chǎn)蛋白的方式有兩種:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。使用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)蛋白,細(xì)胞的選擇培養(yǎng)也不可忽視。常用的有中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO)和人胚腎細(xì)胞(HEK293)。德泰生物主要培養(yǎng)HEK293用于哺乳動物細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,CHO細(xì)胞用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染通過穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建篩選出能夠穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株。針對瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,外源基因在短時(shí)間轉(zhuǎn)錄翻譯得到的蛋白量少,1mg質(zhì)粒得到1mg...
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真核蛋白表達(dá)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方式有兩種:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,本文的主要介紹了兩者的定義和適用性及細(xì)胞轉(zhuǎn)染一般步驟,影響轉(zhuǎn)染效率的因素,幫助我們提高實(shí)驗(yàn)的成功率。在哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá)實(shí)驗(yàn),根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞有兩種方法:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的過程。質(zhì)粒、DNA、RNA將這些外源基因?qū)氲秸婧思?xì)胞內(nèi)并不容易,要跨越細(xì)胞膜的屏障進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指外源基因?qū)氲郊?xì)胞后得以表達(dá),但是基因不整合到細(xì)胞的基因組上,因此不會隨著細(xì)胞的生長...
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人的一生中約有三分之一的時(shí)間都在睡覺,睡眠是整個(gè)動物界生存所必須的過程。有研究表明,動物在醒著的時(shí)候會受到一定程度的神經(jīng)系統(tǒng)損害,由此產(chǎn)生的受損基因和蛋白質(zhì),會在腦部堆積并引起疾病,而睡眠有助于修復(fù)這種損害并清除這些垃圾。也有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),睡眠可以促進(jìn)與學(xué)習(xí)和記憶鞏固相關(guān)的神經(jīng)塑性重組及突觸的生長。但我們目前對于神經(jīng)修復(fù)和重組在睡眠期間的相對作用,以及其在個(gè)體發(fā)育過程中是否會發(fā)生變化仍不清楚。近日,來自英國帝國理工大學(xué)、美國加利福尼亞大學(xué)以及德克薩斯大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)在《Scienc...
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